CRM-ATX a鱼腥藻毒素a标准

CRM-ATX 鱼腥藻毒素a校准溶液Anatoxin-a(ATX-a)是一种蓝藻毒素，与北美[1]和全球[2]的动物死亡有关。CRM-ATX是一种经认证的校准液，用于协助分析人员测定ATX-，每个安瓿中含有大约0.5毫升的ATX-a，以0.01%的乙酸溶解在甲醇水中(9：91，Viv)。

CRM-ATX是一种校准溶液标准物质(CRM)，用于ATX-A的分析方法开发和精确定量。CRM浓度使其适合于制备用于仪器校准的稀释系列，如用紫外吸收法(LC-UV)、荧光法(LC-FL)或质谱法(LC-MS)检测的液相色谱，以及用于回收实验的控制样品。

ATX的准备

ATX-a是从一种异青藤的藻类培养物中分离得到的。从细胞中提取毒素，经层析纯化后，真空干燥至无水形态[4.5]。将纯化的ATX-a溶于9：91的脱气甲醇中，用0.01%的乙酸溶解制得CRM溶液。溶液与聚四氟乙烯包覆搅拌棒和磁混合器完全混合，在氩气下搅拌.在琥珀玻璃安瓿中预先加入氩，然后立即进行火焰密封，每个安瓿中含有约0.5毫升的溶液。

同质性：由于CRM-ATX 鱼腥藻毒素a校准溶液是一个真正的解决方案，所以安瓿之间的变化应该很小。然而，大约0.8%的安瓿是随机选择的，ATX-a浓度是用LC-UV测量的。安瓿之间的变化不大于对一种溶液进行复制分析时的变化，因此在整个安瓿范围内表现出可接受的同质性。

稳定性研究：已进行了广泛的研究，以确定CRM-ATX 鱼腥藻毒素a校准溶液在各种条件下的稳定性。ATX-a在碱性溶液中不稳定，对光敏感[10]。对以前的ATX-a制剂的可行性研究表明，贮存在+4°C的水溶液-储存酸化甲醇/水的溶液具有良好的长期稳定性。在几种温度(-80°C，-20°C，+4°℃，+25 C和+37°C)下，对CRM-ATX进行了长期稳定性研究。ATX--在-20°C储存，在+4°C下分解小于3%，10天后在+37°C保存时，其降解率小于2%。

结构确认和纯度评估

采用500 MHz核磁共振谱、LC-MS[6J，LC-UV]、毛细管电泳-紫外检测(CE-UV)[7]和液相色谱-化学发光氮检测(LC-CLND)[8]等技术对该毒素的纯度进行了检测。用核磁共振[9]和四极飞行时间(QToF)质谱确证了ATX-a的分子结构.[M+H]~*离子在166.12269Da，在理论单同位素质量166.12264 Da(=0.30ppm)的0.05MDA范围内，获得了[M+H]~*离子的串联质谱谱，如图2.NMR、LC-MS、LC-UV和LC-CLND所示，未观察到主要杂质。