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1342412 干扰素β-1A标准品(200 ng)

东莞市仪达实验科技有限公司

1342412  用于生物识别的干扰素Beta-1A (200 ng)(需要国际冷链运输)

CAS:145258-61-3

分子式:C908H1406N246O252S7

补充信息:用指定的单位稀释标准中的生物同一性分析方法。生物同一性测定的实验条件

培养基A:Dulbecco改良鹰培养基(DMEM)含25 mM D-葡萄糖、10%热灭活胎牛血清和4mm L-谷氨酰胺.过滤消毒。

培养基B:Dulbecco改良鹰培养基(DMEM),含25 mM D-葡萄糖、2%热灭活胎牛血清和4mm L-谷氨酰胺。过滤消毒。

萘酚蓝黑(NBB)溶液:0.05%w/v萘酚蓝黑,9%v/v冰醋酸,0.1M三水乙酸钠水溶液。

50 mm NaOH:0.2克NaOH,加水量100 mL1x PBS:pH7.0+/-0.2


1342412 干扰素Beta-1A细胞培养准备:

在培养基A中制备人肺癌细胞系A549的粘附细胞培养物,并在37°C、含5%二氧化碳的湿润培养箱中孵育。细胞应通过胰蛋白酶消化法传代,大约每周一次,四天后用培养基a喂养。(注意:细胞初始解冻后,细胞应在解冻后三天喂养。)(注意:在用于测定之前,细胞应传代2-3次)。在测定前一天(测定设置前20-24小时),通过从烧瓶中取出培养基并添加足够体积的细胞培养级胰蛋白酶-EDTA溶液覆盖烧瓶表面来移出细胞。摇动烧瓶,然后再次放入37°C培养箱中5-10分钟。取出烧瓶,轻敲烧瓶以移出细胞,然后向每个烧瓶中加入37°C介质A。

将所有胰蛋白酶化的细胞溶液无菌地汇集到一个合适的无菌容器中,用培养基a以1:2稀释,上下移液细胞以分解团块,然后计数细胞。用培养基A调节细胞密度,使最终浓度为2.5×105个细胞/mL,并充分混合以确保单细胞悬浮液。将100µL这种悬浮液接种到96孔组织培养板的每个孔中,并在37°C、5%二氧化碳(CO2)下孵育20-24小时。


标准原液:用适当数量的无菌蒸馏水改造USP 1342412 干扰素Beta-1A用于生物特性RS,制成0.2微克/mL的溶液,然后再用MediumB稀释至10,000单位/mL或50,000 pg/mL。

测试库存溶液:稀释干扰素Beta-1A测试材料,介质B至10,000单位/毫升,50,000皮克/毫升。

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