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SRM 2925 - 重组人血清白蛋白溶液(尿白蛋白初级参考标准)旨在用于校准液相色谱串联质谱法,用于测定人血清白蛋白 (HSA)。使用氨基酸分析确定该 SRM 中重组 HSA 的浓度。一个单元的 SRM 2925 由两个小瓶组成,每个小瓶含有大约 0.5 mL 的溶液。最终用户需要评估 SRM 2925 是否适用于需要充分表征的蛋白质进行校准或评估的其他应用,包括总蛋白质的比色分析、凝胶扩散、氨基酸分析、电泳或基于蛋白质组学的实验工作流程。
认证浓度值:重组人血清白蛋白 (HSA) 的认证浓度值是通过使用同位素稀释-液相色谱-串联质谱 (ID-LC-MS/MS) [1] 的氨基酸分析确定的。 被测量是使用为每个氨基酸确定的物质量和 HSA 的已知氨基酸序列计算出的重组 HSA 的总浓度。 计量溯源性是摩尔浓度的 SI 衍生单位(表示为每克纳摩尔)。
经认证的重组 HSA 浓度:14.4 nmol/g ± 0.3 nmol/g
NIST 认证值是 NIST 对其准确性最有信心的值,因为所有已知或可疑的偏差来源都已被调查或考虑 [2]。重组 HSA 的认证浓度是使用高阶参考测量程序 [3] 确定的,该程序用氨基酸认证参考材料校准。不确定度提供值是覆盖被测量的平均值的扩展不确定度,与 ISO/JCGM 指南 [4] 一致。扩展不确定度计算为 U = kuc,其中 uc 是组合标准不确定度,k 是对应于该分析物约 95% 置信度的覆盖因子 [4]。对于上面显示的认证值,k = 2。
非认证值:表 1 中列出了 SRM 2925 中重组 HSA 密度和浓度的非认证参考值(以克/升表示)。真实值;然而,这些值不符合 NIST 的认证标准,并带有相关的不确定性,这些不确定性可能仅反映测量精度,可能不包括所有不确定性来源,或者可能反映多种分析方法之间缺乏足够的统计一致性 [2,4] . SRM 2925 中重组 HSA 的参考值浓度(以克/升表示)是使用相对分子质量(根据氨基酸序列计算)、密度值和上述经认证的重组 HSA 浓度值计算得出的。计量溯源性是指浓度的 SI 测量单位,表示为克/毫升或克/升,由所使用的方法实现。相对分子质量的非认证信息值也包含在表 1 中。信息值是 SRM 用户可能感兴趣的值,但没有足够的信息来评估与该值相关的不确定性 [2]。信息值不能用于建立计量溯源性
SRM 2925 - 重组人血清白蛋白溶液在毕赤酵母细胞中表达,可能含有对健康构成威胁的毒素。在材料的处理和使用过程中,应小心谨慎。
处理、储存和使用说明
处理和储存: SRM 2925 以冷冻(在干冰上)运输,收到后应冷冻储存直至准备使用。 –20 °C 的冷冻室温度可以存放长达一周。如果预计需要更长的储存时间,材料应储存在 –80 °C 或以下。 SRM 不应暴露在阳光或紫外线辐射下。在室温(20°C 至 25°C)或冰箱(5°C 至 8°C)温度下储存解冻材料可能会导致组成蛋白质的降解或修饰。
使用:待分析的 SRM 的冷冻小瓶应从冰箱中取出,放置在冰上或室温(20 °C 至 25 °C)下直至解冻。材料解冻后应立即使用。在取出等分试样之前,应使用涡旋混合器将材料短暂混合。
材料来源:标准物质 NIST SRM 2925 - 重组人血清白蛋白溶液是重组 HSA 的冷冻水溶液,在毕赤酵母中表达。储备材料购自 Albumin Bioscience,Albumin Therapeutics, LLC, (Huntsville, AL) 的业务部门,储备缓冲液由 5% 磷酸盐缓冲盐水溶液组成,其中含有 4 mmol/L 辛酸钠和 4 mmol/L 乙酰色氨酸。 SRM 2925 在 NIST 制备,方法是通过凝胶过滤色谱法(3,000 g/mol 截断值)对储备材料进行脱盐,并将储备缓冲液更换为 50 mmol/L 碳酸氢铵水溶液。